Características de los hongos dermatofitos, Malassezia y Piedraia

Trichophyton rubrum

Colonias de micelio aéreo blanco, de aspecto algodonoso, al reverso puede observarse un pigmento de color púrpura.

Al microscopio se observan hifas septadas con microconidias sésiles piriformes, a veces puede observarse macroconidias, clamidosporas y cuerpos nodulares.

Trichophyton mentagrophytes

Colonias blanquecinas pulverulentas, granuladas, yesosas, al reverso puede observarse un pigmento amarillo-pardusco.

Al microscopio se observan hifas septadas con abundante microconidias esféricas agrupadas, pueden presentar hifas en espiral y macroconidias.

Trichophyton tonsurans

Colonias membranosas, crateriformes o cerebriformes de consistencia acartonada con pigmentación amarillo-castaño al reverso.

Al microscopio se observan microconidias piriformes hialinas, clamidosporas, e hifas en raquetas septadas, pueden observarse macroconidios.

Microsporum gypseum

Colonias poco elevadas pulverulentas con pigmento de color canela.

Al microscopio se observan hifas septadas, macroconidios con tabiques transversales en número de 4-6, rara vez se observan microconidias.

Microsporum canis

Colonias de color blanquecino poco elevado, con pigmento amarillo-naranja en el reverso de la colonia.

Al microscopio se observan macroconidios fusiformes hasta con 8 tabiques transversales y con pequeñas excrecencias en la superficie, pueden también observarse microconidias y clamidosporas.

Epidermophyton floccosum

Colonias de aspecto aterciopelado, pulverulentas de color amarillo-azufre con pliegues en la colonia.

Al microscopio se observan macroconidios con su extremo distal romo y con 3-4 tabiques transversales, pueden encontrarse aisladas o en racimo.

Malassezia furfur (Pityrosporum)

Al microscopio se observan hifas cortas de extremos romos al lado de formas redondeadas agrupadas; este hongo no se desarrolla en medios comunes, por lo que el diagnóstico se da por el examen directo de la muestra

Piedraia hortai

Los nódulos se observan en el tallo piloso como costras arenosas, duras de color pardo a negro que envuelven completamente el tallo piloso.

Protocolo

Realizar esquemas o dibujos de lo observado en la práctica

Práctica Nº 33

Estudio de hongos levaduriformes. Observación de cortes histopatológicos.

Introducción:

Los hongos levaduriformes son frecuentes en el suelo, aguas, plantas y en las cavidades naturales del hombre como el tubo digestivo y en las regiones de los pliegues cutáneos. Muchas especies han sido vinculadas a infecciones humanas como la Candida albicans y otras especies de Candida que pueden producir infecciones agudas o crónicas en la piel o mucosas, aparato genitourinario y respiratorio; otras levaduras como Cryptococcus neoformans pueden causar infecciones cerebrales y rara vez infecciones cutáneas; en el hombre la infección primaria es casi siempre pulmonar.

Materiales

– Cultivo con Candida albicans y Cryptococcus neoformans.

– Láminas de Candida albicans en Agar harina de maíz.

– Láminas de Cryptococcus neoformans en tinta china.

– Cortes histológicos con C. albicans y Cr. neoformans.

– Material básico de laboratorio (xilol, algodón, alcohol)

– Microscopios con lentes de menor y mayor aumento.

Procedimiento

1.- Estudiar las características macroscópicas de los diferentes cultivos, observando el aspecto y consistencia de la colonia.

2.- Observar al microscopio las características que presentan cada especie de los hongos en el Agar harina de maíz, tinta china y en los cortes histológicos.

Característica de los hongos levaduriformes

Candida albicans

Las colonias son de aspecto cremoso y consistente, de color blanco perlado.

En el Agar-almidón-arroz, se observan clamidospora, pseudomicelio y blastospora que tipifican a Candida albicans.

En los cortes histopatológicos observar la presencia de filamentos cortos y levaduras en las lesiones rodeadas de una zona de histiocitos.

Cryptococcus neoformans

Las colonias son de color blanquecino perlado al inicio, luego se tornan de color ocre, de aspecto mucoide viscosas y brillantes con tendencia a deslizarse hacia el fondo del tubo de cultivo.

En las láminas con tinta china se aprecia la cápsula como un halo brillante entre el borde de la levadura y el fondo oscuro dado por la tinta china.

En los cortes histopatológicos, se observan como levaduras a lo largo de los vasos en las lesiones, las cuales comprimen los tejidos vecinos y los necrosan, escasa infiltración celular.

Práctica Nº 34

Estudio de hongos dimórficos. Observación de cortes histopatológicos.

*Introducción

Los hongos dimórficos son hongos causantes de infecciones mucocutáneas y/o sistémicas en el hombre y algunos animales.

Paracoccidioides brasiliensis

En su fase inicial esporógena, se encuentra en el suelo, fragmentos vegetales, espinas, etc. Y en su fase de levadura en tejidos infectados.

Es el agente causante de la Paracoccidioidomicosis, infección crónica, granulomatosa de la piel, mucosa, ganglios y vísceras. Es más frecuente entre los trabajadores rurales.

Histoplasma capsulatum

En el ambiente natural se encuentra en la fase miceliar esporógena, que se desarrolla principalmente sobre compuestos nitrogenados, tales como excretas de aves (gallina, lechuza), excremento de murciélagos, etc., y en su fase de levadura se encuentra en tejido infectado.

Es el agente causal de la Histoplasmosis que puede afectar el sistema respiratorio en su forma benigna pudiendo producir calcificaciones dispersas en los campos pulmonares.

Sporothrix schenckii

Hongo que vive en el suelo, sobre plantas, produce la Esporotricosis en el hombre y algunos animales, el hongo ingresa generalmente por traumatismo con restos punzantes de vegetales contaminados con el hongo. La infección está localizada preferentemente en los ganglios linfáticos

*Materiales

– Cultivo en Agar Sabouraud y Agar BHI de P. brasiliensis, H. capsulatum, S. schenckii.

– Microcultivos coloreados con Azul de lactofenol

– Cortes histológicos infectados por estos hongos.

*Procedimiento

1. Estudiar las características macroscópicas de los diferentes cultivos, observando el tipo de micelio, aspecto de la colonia y consistencia de la colonia.

2. Observar las características microscópicas de cada uno de los hongos.

*Características de los hongos dimórficos

Paracoccidioides brasiliensis

En los frotis coloreados con Leishman o en cortes histológicos, se presentan como células esféricas u ovaladas de 10 a 80 micras de diámetro, con doble membrana y multigemantes.

En cultivo en Agar Sabouraud glucosado desarrolla colonias de micelio aéreo de color blanco compacto, de crecimiento lento. Microscópicamente se observan filamentos hialinos, tabicados con microconidias esféricas o piriformes.

En Agar Infusión cerebro corazón (BHI), se observan colonias cerebriformes, de color beige claro. Microscópicamente se observan células esféricas.

Histoplasma capsulatum

En frotis o cortes histológicos se observan intracelularmente como nidos de levadura incluidas en los histiocitos o polimorfonucleares. Las levaduras son pequeñas, redondas u ovaladas de 1-3 micras de diámetro.

En Agar Sabouraud glucosado, desarrolla colonias algodonosas de color blanco. Microscópicamente se observan hifas tabicadas con escasa producción de microconidias y gran cantidad de macroconidias tuberculadas redondas y grandes de pared gruesa “Clamidospora tuberculada”.

En el medio BHI desarrolla colonias pequeñas de aspecto membranoso rugoso, color marrón claro. Microscópicamente, se observan como células ovaladas a veces gemantes.

Sporothrix schenckii

En Agar Sabouraud glucosado desarrolla colonias al inicio pequeñas, blanquecinas presentando posteriormente un aspecto húmedo, rugoso y membranoso, de un color que puede variar de crema a negro.

Microscópicamente se observan hifas finas tabicadas con cortos conidióforos en cuyo extremo se encuentran las conidias agrupadas dando el aspecto de una margarita.

En medio BHI, desarrolla colonias levaduriformes. Al microscopio se observan células engemación ovales o en forma de cigarrillos Gram positivos.

Protocolo

Esquematice o dibuje lo observado en la práctica.