Diagnóstico Microbiológico de las Infecciones del Tracto Urinario

Recolección y Transporte de la Muestra

Envase

— El envase debe ser estéril. Cuando es de vidrio, debe ser esterilizado por el mismo laboratorio y debe tener una tapa a prueba de fugas.

— Actualmente son utilizados envases de plástico esterilizado comerciales a bajo costo que evita los problemas de reutilización o presencia de sustancias extrañas en los envases.

Identificación

— El laboratorio debe contar con un mínimo de información para el procesamiento de las muestras.

Transporte

— Las muestras no deben permanecer más de dos horas a temperatura ambiente, que se cuenta desde el momento en que se obtiene la muestra hasta cuando llega al laboratorio.

— Todas las muestras deben ser conservadas a partir de su emisión entre 2 a 8°C (temperatura de refrigeración).

— Las muestras en refrigeración pueden conservarse hasta 24 horas, sin embargo, debe ser sembradas lo más rápido posible.

Criterios de Rechazo de Muestra

— Muestras de orina visiblemente contaminadas con heces.

— Muestras de orina conservadas durante más de dos horas a temperatura ambiente.

Examen Físico y Químico de la Orina

Aspecto

— Puede ser transparente, ligeramente turbio, turbio o hemático.

Color

— Medicamentoso por el consumo de medicamentos que contengan fenazopiridina (Pyridium) que le da un color característico a la orina; este es un analgésico urinario y no tiene ningún efecto antibacteriano a no ser que se asocie a algún antibiótico.

Presencia de Nitritos en Orina

— Las enterobacterias son capaces de reducir nitrato a nitritos y estos son detectados mediante una tira diagnóstica. Es un procedimiento fácil de realizar y se incluye en el examen de orina completo.

— Los falsos negativos son frecuentes debido a que hay bacterias que no reducen los nitratos, pero los falsos positivos son raros.

Examen del Sedimento

— Este es un proceso que debe ser estandarizado para que sus resultados sean reproducibles y confiables. Muchas veces surgen discrepancias con los resultados del examen completo de orina, pues muchas veces las muestras son diferentes (unas obtenidas con un método aséptico y otras no) o porque los volúmenes y velocidades de centrifugación no son iguales (equipos diferentes).

Muestra

— Orina obtenida en forma aséptica

— Volumen: 5 a 7 mL

— Centrifugar 5 minutos a 3000 rpm

— Observación en el microscopio a 400 aumentos.

Examen: Buscar y Cuantificar las Siguientes Estructuras

  • Células epiteliales, cantidad, asociación de bacterias
  • Leucocitos: número y presencia de aglutinación, tomar en cuenta que 1 leucocito equivale a 5-10 leucocitos/mL de orina. El valor de referencia es tener < 5 leucocitos por campo 400x.
  • Cilindros granulosos, hialinos, hemáticos o leucocitarios
  • Cristales oxalato de calcio, fosfato amónico magnesiano
  • Hematíes
  • Otros elementos como espermatozoides

— Las bacterias pueden indicar presencia de infección pero también pueden estar presentes como contaminación vaginal.

Coloración de Gram

— Una bacteria por campo de inmersión en orina sin centrifugar es equivalente a un cultivo con presencia de 105 bacterias x mL. Debemos recordar que puede haber infecciones con recuentos menores a este valor.

Cultivos

Se puede utilizar medios que permitan el desarrollo de las bacterias que producen infección urinaria, se puede utilizar agar sangre, agar Mac Conkey, agar CLED o Brolacin, algunos laboratorios utilizan agar manitol salado, agar EMB o agar sangre azida de sodio. Aunque hay varios métodos para la siembra, solo describimos el método utilizando el asa calibrada.

Cultivo

— Utilizando el asa de cultivo calibrada (1 o 5 μL) se introducirá en forma perpendicular en el recipiente de orina y se sembrará en un cuadrante de la placa de Agar Mac Conkey según el esquema de siembra.

— El procedimiento se repetirá para sembrar un cuadrante con agar sangre. Primero se hace una estría longitudinal y luego estrías transversales lo que permiten una adecuada distribución de la muestra para permitir el recuento.

— Se realizará la determinación de presencia de sustancias antibacterianas residuales.

— Las placas serán incubadas a 35°C por 18 horas.

Identificación y Recuento

Examen de los Cultivos

  • Después de incubar se realizará el recuento de colonias.
  • Se realizará la identificación de los cultivos.
  • Se realizará el antibiograma si corresponde.
  • El sedimento se conservará 24 horas.

— Las muestras con un sedimento patológico (más de 5 leucocitos por campo de 400x) y con un recuento de colonias menor de 10,000 UFC/mL serán resembradas en agar chocolate e incubadas en CO2 por 24 horas. Las placas originales deben ser conservadas en incubación por 24 horas adicionales.

Identificación

— Se necesita contar con los siguientes medios y reactivos para la identificación de las bacterias más comunes productoras de ITU aparte de la coloración de Gram:

  • Enterobacterias: agar TSI, agar LIA, agar citrato de Simmons, medio de movilidad (SIM) y la prueba de indol.