Análisis del líquido seminal y sus componentes
LIQ. SEMINAL:
semen:producto de la secrecion procedente de los testiculos, el epididimo, la vesicula seminal y la prostata.semen normal:compuesto de una suspension de espermatozoides en un medio liquido que leproporciona los nutrientes y las condiciones fisicoquimicas adecuadas para que los espermatozoides puedan desarrollar su actividad. El producto final es un liquido viscoso denominado eyaculado y esta compuesto de cuatro fracciones que provienen de:1.Glandulas bulbouretrales y uretrales:secreción alcalina compuesta por mucoproteínas,galactosa y ácido oxálico.Fracción pre-eyaculatoria,10-15% del volumen.2.Prostata:Segrega un liquido lechoso, acido,que contiene enzimas proteoliticas que actuan sobre los productos de secrecion de las vesiculas seminales provocando su coagulacion y licuefaccion. Fracción previa 20 % del volumen.3.Testiculos y epididimo:Los espermatozoides se producen en los testiculos,maduran durante unas tres semanas en el epididimo y son almacenados hasta la eyaculacion o reabsorbidos si la eyaculacion no se produce.Los espermatozoides corresponden a una pequena cantidad del volumen total del semen. Fraccion principal 5-10 % del volumen.4.Vesiculas seminales:Producen un liquido opalescente, algo amarillento, viscoso y alcalino que proporciona fructosa y otros nutrientes para los espermatozoides.Constituye el mayor volumen del total y su funcion es la produccion de ATP en las mitocondrias del espermatozoide y con ello la motilidad y viabilidad de los espermatozoides. Fracción final 50-60 % del volumen.-.-.-.En el momento de producirse la eyaculacion,los espermatozoides son impulsados a traves del conducto deferente y del conducto eyaculador,donde se unen a las secreciones producidas por las vesiculas seminales y prostata, hasta su expulsion a traves de la uretra.-.-.-.El liquido seminal recien emitido no tiene una composicion uniforme y unicamente cuando se ha producido la licuacion es adecuado para realizar su analisis.-.-.-.El liquido seminal se recibe en el laboratorio para practicar 3 tipos de analisis:_Valoracion de casos de infertilidad._Post-vasectomia._Identificacion de semen medicina legal.-.-.-.Examen macroscopico:Volumen:Aspermia:no espermatozoides.Hipospermia/Oligospermia:pocos espermatozoides.normospermia:normal.Hiperespermia:mxs espermatozoides.Viscosidad/Consistencia:La muestra debe haberse licuado por completo antes deobservar la viscosidad.Cuando depositamos el semen en el tubo de centrifuga para medir el volumen, este cae desde la pipeta Pasteur gota a gota y no tiene aspecto aglutinado ni filamentoso.En una muestra normal se observan gotas pequenas y bien definidas mientras que en una muestra de consistencia aumentada se formara un filamento mayor de 2 cm.Un incremento de la viscosidad como sucede cuando hay un alto contenido de moco, puede interferir en la determinacion de varias caracteristicas del semen como la motilidad y la concentracion asi como a la deteccion de anticuerpos unidos a la superficie de los espermatozoides.En el informe se califica de 0 = acuoso a 4 = semejante a gel.Filancia:Se determina observando el filamento que se forma al retirar la punta de una pipeta, una varilla fina o un asa de platino de la muestra que no debe superar un centimetro de longitud. La presencia de hilos de mocoes senal de licuefaccion incompleta.pH:ligeramente alcalino.determinacion dentro de los 60 minutos siguientes a la eyaculacion por la alcalinizacion que sufre la muestra.Si la proporcion de liquido prostatico es anormalmente alta, el pH del semen se acidifica;si predomina la secrecion de las vesiculas seminales,el pH es alcalino.Licuefacción:El liquido seminal se coagula tras la eyaculacion por accion de una enzima prostatica sobre un precursor semejante al fibrinogeno producido por las vesiculas seminales.El liquido seminal a 37o C se licua en 20-30 minutos debido a la accion de enzimas de origen prostatico y a los 30 minutos debe estar completamente licuado.La licuefaccion anormal no tiene importancia clinica pero puede interferir en el analisis.Se informa como normal -licuado- o anormal -grumos, coágulos, hebras-.Color:La muestra debe ser examinada inmediatamente tras la licuefaccion o dentro de los 60 minutos de eyaculada, por simple inspeccion a temperatura ambiente.Una muestra normal tiene un aspecto homogeneo blanquecinoopalescente o nacarado y muy viscoso en el momento de la eyaculacion y origina un liquido translucido, turbio y viscoso cuando ha licuado.Tras la licuacion, se informa como normal:aspecto blanquecino opalescente-, posible azoospermia:transparente, posible presencia de leucocitos:amarillo, posible hemospermia:pardo-rojizo-.Examen microscopico:1-Recuento de los espermatozoides:Se determina con el método del hemocitómetro y los valores normales oscilan entre 20 y 160 millones de espermatozoides por mililitro.El recuento se puede realizar de forma automatica o manual.Recuento manual:Se utiliza para realizar el recuento una cámara Neubauer Improved, siendo el procedimiento semejante al recuento de celulas sanguineas o, si no se diluye la muestra, en la cámara de Makler.Recuento en cámara Neubauer Improved:1º.Homogenizar muestra mediante una varilla agitadora.2º.Dilución de la muestra.a)Utilizando la pipeta de Thoma.b) Mediante pipeta automática.3º.Carga de la cámara de recuento.4º.Observacióncon microscopio.Los espermatozoides sin cabeza o las cabezas solas no se cuentan.Recuento en cámara de Makler:cámara diseñada para el recuento de espermatozoides.ventaja de no requerir dilucion previa de la muestra (excepto si la concentracion de espermatozoides es muy elevada) facilita la visualizacion de los espermatozoides en un unico plano y la obtencion del numero de espermatozoides/ml se obtiene sin necesidad de realizar calculos pero tiene menos precision de la tecnica del hemocitometro
2-Movilidad (Motilidad):La determinacion de la movilidad puede realizarse mediante observacion directa o con analizadores de calidad del esperma.Estudio de la movilidad mediante observacion directa:Se hace con la muestra sin diluir determinando el porcentaje de espermatozoides que muestran motilidad activa dentro de las primeras tres horas de su obtencion.ponemos 2gotas de semen previamente licuado y homogeneizado sobre un portaobjetos a 37o C; lo dejamos estabilizar un min.comprobamo que la movilidad de los espermatozoides es semejante en ambas gotas.Es necesario observar al menos 25 campos con un objetivo de 40x o contar 200 espermatozoides anotando en primer lugar los espermatozoides moviles tipo a y b y a continuacion los c y d. Repetir en la otra gota.Las formas moviles disminuyen un 5% por hora a partir de la cuarta hora de la recogida.Categorias segun OMS:A->mov rapido y rectilineo.B->mov progresivo,pero menor o no rectilineo.C->mov sin progresion.D->inmov.-.-.-.Se informa un promedio de los resultados, es decir,porcentaje de espermatozoides que presentan movilidad y porcentaje de espermatozoides inmoviles. Se califica de normal a los 60 minutos de la eyaculacion: = 50% de espermatozoides con movilidad tipo a + b—- = 25 % con movilidad tipo a.astenospermia:valores inferiores o iguales a los anteriores.Hay que tener en cuenta:Las colas sueltas no se cuentan._La presencia de agregaciones o aglutinaciones:la valoracion se hara sobre las formas moviles._Concentraciones muy elevadas._Viscosidad muy elevada: puede parecer astenozoospermia y contajes dispares._Elevado numero de celulas redondas con las que, al chocar los espermatozoides, pueden frenar su marcha.3-Indice de vitalidad (Test de Williams Pollack):Los espermatozoides inmoviles pueden estar vivos o muertos. Si la cantidad de espermatozoides inmóviles supera el 50% se puede determinar la proporcion de espermatozoides vivos con tecnicas de tincion supravital.Los espermatozoides muertos presentan un incremento de la permeabilidad de la membrana a la eosina y por lo tanto sus cabezas adquieren un color rosa en presencia del colorante permaneciendo con su color normal, blanco azulado,los espermatozoides vivos. Para resaltar los espermatozoides se puede utilizar otro colorante, la nigrosina que tine el fondo de la preparacion de purpura (tecnica de Williams Pollack).-.-.La vitalidad de los espermatozoides se puede determinar en fresco o en frotis tenido.La observacion se puede realizar con contraste de fases o campo claro.tecnica de coloracion en fresco y tecnica mediante frotis teñido.4-Formula espermatica(espermiocitograma)Durante la espermatogenesis se producen alteraciones en la formacion de los espermatozoides originando formas anormales que, si están en exceso, disminuyen la capacidad de fecundación del semen donde se encuentran.La valoracion de estos espermatozoides anormales se realiza mediante recuentos diferenciales en extensiones teñidas.El eyaculado siempre contiene celulas diferentes de los espermatozoides; encontramos celulas epiteliales del tracto uretral, celulas de la espermatogenesis y leucocitos. Estas celulas reciben el nombre generico de celulas redondas y, en general, no debe haber mas de 5 × 10^6 celulas redondas/ml y el numero de leucocitos no exceder 1×10^6/ml.-.-. MayGrümwald-Giemsa.-.-.Un porcentaje de espermatozoides anormales entre el 30 y 40% es hipofecundante. Si supera el 40% se informa como teratospermiay el semen es estéril . La presencia de más del 0,5 % de células epiteliales descamadas hace sospechar inflamacionde uretra y/o prostata.Un incremento de los leucocitos superior a 1-2 por campo a 40x indica piospermia e indica un proceso infeccioso de origen bacteriano al igual que la presencia de eritrocitos.Analisis bioquimico.En el estudio bioquimico se avaluan componentes procedentes de les vesiculas seminales(fructosa), la prostata(ac nitrico,,fosfatasa acida,zinc) y los epididimos(carnitina).Marcadores prostaticos:Ac. Citrico:representativo del funcionalismo prostatico y su determinacion es mas simple que la de la Fosfatasa Acida.Los valores superiores provocan esclerosis del endotelio del tubulo seminifero por deposito de Ca.El deficit impide que el proceso de maduracion de los espermatozoides sea adecuado y la motricidad de los espermatozoides sera insuficiente.determinacion x espectrofotometria.Marcadores de las vesiculas seminalesFructosa: la glucosa que llega a traves del torrente sanguineo a las vesiculas seminales es transformada en fructosa y concentrada por el efecto de la testosterona.Se encuentra disminuida en los trastornos de las vesiculas seminales o cuando falta la estimulacion de la testosterona.determinacion x espectrofotometria.ANALISIS POST-VASECTOMIA:realizado antes de 4 horas desde la obtención de la muestra.Si la muestra es + (no hay espermatozoides), se informa ECO1 primera muestra recibida, remitir nueva muestra dentro de un mes para concluir o proseguir estudio.Si es la segunda muestra consecutiva sin presencia de espermatozoides reinforma ECO2 segunda muestra consecutiva negativa: Azoospermia y se da por finalizado el estudio.-.-.Se informa ALTA tras dos azoospermias consecutivas con 2-4 semanas de intervalo antes de suspender la anticoncepcion preventiva tras vasectomia.Si la muestra es – (hay espermatozoides), se informa como ECO3:remitir nueva muestra dentro de un mes para proseguir estudio.