Técnicas de Observación de Bacterias

Observación de Bacterias Vivas

  • Microscopio de fase contrastada: Permite observar bacterias sin teñir, revelando su morfología y movilidad.
  • Con fondo oscuro: Utiliza el fenómeno de Tyndall para iluminar directamente los microorganismos, haciéndolos visibles.
  • Gota colgante: Suspende los microorganismos en un líquido y los observa en una gota sobre un cubreobjetos.

Observación de Bacterias Muertas

Tinciones:

  • Tinciones simples: Utilizan un solo colorante para revelar la presencia y forma de los microorganismos.
  • Tinción negativa: Tiñe el fondo, dejando las células sin teñir y visibles como entidades claras.
  • Tinciones especiales: Se utilizan para observar estructuras específicas, como cápsulas o esporas.
  • Tinciones diferenciales: Diferencian bacterias según su estructura y composición, como la tinción de Gram.

Observación de Esporas

  • Tinción de endosporas: Tiñe las esporas en verde, haciéndolas visibles.

Observación de Cápsulas

  • Tinción negativa con tinta china: Tiñe el fondo, dejando la cápsula sin teñir y visible como un halo claro.

Técnicas de Cultivo de Bacterias

Medios de Cultivo

  • Agar sangre: Enriquecido con sangre, permite observar la hemólisis bacteriana.
  • Agar manitol: Selectivo para micrococos y estafilococos, permite diferenciarlos por su capacidad de fermentar manitol.

Pruebas Bioquímicas

  • Identificación bioquímica: Diferencia géneros y especies bacterianos según su capacidad de utilizar fuentes de carbono y producir productos metabólicos.
  • Pruebas enzimáticas: Detectan la presencia de enzimas específicas, como catalasa, ureasa y oxidasa.
  • Sensibilidad a compuestos químicos: Determinan la susceptibilidad de las bacterias a antibióticos y otros compuestos.

Pruebas Serológicas

  • Bilis/Esculina: Distingue enterococos de otros cocos Gram positivos catalasa negativos.
  • Kirby Bauer: Estudio cualitativo de la sensibilidad a antimicrobianos.

Pruebas de Motilidad

  • Agar tendido: Permite observar la motilidad bacteriana.

Pruebas de Utilización de Sustratos

  • Agar urea: Detecta la producción de ureasa.
  • Citrato: Determina la capacidad de transportar citrato.
  • TSI (Triple Sugar Iron): Visualiza la utilización de azúcares y la producción de gases.
  • LIA (Lisina Iron Agar): Detecta la desaminación y descarboxilación de aminoácidos.
  • MIO (Motility Indole Ornithine): Observa la motilidad, la producción de indol y la descarboxilación de ornitina.

Bacterias Probióticas

  • Bifidobacterium y Lactobacillus: Bacterias vivas que benefician al organismo hospedero.

Anaerobiosis

  • GASPAK: Sistema que genera un ambiente anaeróbico para el cultivo de bacterias anaerobias.

Medios Selectivos

  • Caldo MacConkey: Selectivo para microorganismos coliformes.
  • Agar cetrimida: Selectivo para Pseudomonas aeruginosa y otras especies.