Métodos de Laboratorio para el Análisis de Colesterol, Glucosa y Urea en Sangre
Métodos para la Investigación de Colesterol en Sangre
Método de Caraway y Fanger Modificado
- Desproteinización en frío y liberación de colesterol al suero con mezcla de ácido acético y anhídrido acético.
- Eliminación de proteínas por centrifugación.
- Reacción de Lieberman-Burchard (L-B) con ácido sulfúrico para formar colestapolieno.
Método de Lieberman-Burchard
- Oxidación gradual del colesterol en medio ácido fuerte (ácido sulfúrico, acético y anhídrido acético).
- Formación de ácido colesta-hexano-sulfónico cromóforo con máximo de absorbancia a 620 nm.
Método Enzimático
- Oxidación enzimática del colesterol por colesterol oxidasa (CHOD).
- Hidrólisis de ésteres por lipasa fúngica.
- Copulación oxidativa del fenol con 4-aminofenazona catalizada por peroxidasa (POD).
- Producto: quinonimina roja con absorbancia máxima a 505 nm.
Métodos para la Investigación de Glucosa en Suero o Plasma
Método de la Orto-Toluidina
- Reacción del grupo aldehído de la glucosa con orto-toluidina en solución ácida.
- Formación de glucosilamina y base de Schiff coloreada.
Método de Folin-Wu
- Formación de óxido cuproso con sulfato de cobre en solución alcalina.
- Reacción con reactivo fosfomolíbdico para formar color azul cuya intensidad depende de la concentración de glucosa.
Método Enzimático
- Oxidación enzimática de la glucosa por glucosa oxidasa (GOD) a ácido glucónico y H2O2.
- Unión oxidativa del fenol con 4-aminofenazona (4-AF) catalizada por peroxidasa (POD).
- Cromógeno rojo cereza con absorbancia máxima a 505 nm.
Investigación de Urea en Sangre
Método Enzimático Específico
- Descomposición de la urea por ureasa en dióxido de carbono y amoniaco.
- Reacción del amoniaco con fenol e hipoclorito para formar azul de indofenol.
- Determinación colorimétrica del azul de indofenol.
Patologías Relacionadas
Colesterol
- Hipercolesterolemia: Niveles elevados de colesterol en sangre.
Glucosa
- Diabetes mellitus: Secreción anormal de insulina que lleva a hiperglicemia.
- Hipoglicemia: Niveles bajos de glucosa en sangre.
Urea
- Insuficiencia renal: Niveles elevados de urea en sangre.
- Coma urémico: Aumento persistente de urea en sangre que lleva a un estado irreversible.
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