Métodos para la Investigación de Colesterol en Sangre

Método de Caraway y Fanger Modificado

  • Desproteinización en frío y liberación de colesterol al suero con mezcla de ácido acético y anhídrido acético.
  • Eliminación de proteínas por centrifugación.
  • Reacción de Lieberman-Burchard (L-B) con ácido sulfúrico para formar colestapolieno.

Método de Lieberman-Burchard

  • Oxidación gradual del colesterol en medio ácido fuerte (ácido sulfúrico, acético y anhídrido acético).
  • Formación de ácido colesta-hexano-sulfónico cromóforo con máximo de absorbancia a 620 nm.

Método Enzimático

  • Oxidación enzimática del colesterol por colesterol oxidasa (CHOD).
  • Hidrólisis de ésteres por lipasa fúngica.
  • Copulación oxidativa del fenol con 4-aminofenazona catalizada por peroxidasa (POD).
  • Producto: quinonimina roja con absorbancia máxima a 505 nm.

Métodos para la Investigación de Glucosa en Suero o Plasma

Método de la Orto-Toluidina

  • Reacción del grupo aldehído de la glucosa con orto-toluidina en solución ácida.
  • Formación de glucosilamina y base de Schiff coloreada.

Método de Folin-Wu

  • Formación de óxido cuproso con sulfato de cobre en solución alcalina.
  • Reacción con reactivo fosfomolíbdico para formar color azul cuya intensidad depende de la concentración de glucosa.

Método Enzimático

  • Oxidación enzimática de la glucosa por glucosa oxidasa (GOD) a ácido glucónico y H2O2.
  • Unión oxidativa del fenol con 4-aminofenazona (4-AF) catalizada por peroxidasa (POD).
  • Cromógeno rojo cereza con absorbancia máxima a 505 nm.

Investigación de Urea en Sangre

Método Enzimático Específico

  • Descomposición de la urea por ureasa en dióxido de carbono y amoniaco.
  • Reacción del amoniaco con fenol e hipoclorito para formar azul de indofenol.
  • Determinación colorimétrica del azul de indofenol.

Patologías Relacionadas

Colesterol

  • Hipercolesterolemia: Niveles elevados de colesterol en sangre.

Glucosa

  • Diabetes mellitus: Secreción anormal de insulina que lleva a hiperglicemia.
  • Hipoglicemia: Niveles bajos de glucosa en sangre.

Urea

  • Insuficiencia renal: Niveles elevados de urea en sangre.
  • Coma urémico: Aumento persistente de urea en sangre que lleva a un estado irreversible.