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Protocolo de Isoelectroenfoque y SDS-PAGE
18 febrero, 2024
en Química
Protocolo de Isoelectroenfoque
Resolubilizar las proteínas precipitadas en 125 µl de tampón de rehidratación (7M urea, 2M tiourea, 4% w/v CHAPS, IPG tampón 0.5% (v/v), 3mg/ml DTT, 0.002% azul de bromofenol) por agitación constante de 1 hora a temperatura ambiente.
Luego, centrifugar las muestras
a 13000 rpm por 10 minutos para remover el material insoluble.
Cuantificar las proteínas
siguiendo el procedimiento descrito previamente. La muestra debe contener entre 50 a 200 µg de proteína.